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      產(chǎn)品分類PRODUCT

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      AAT Bioquest iFluor® 488 succinimidyl ester

      • 產(chǎn)品型號:1023
      • 更新時(shí)間:2024-10-09

      簡要描述:AAT Bioquest 1023 iFluor® 488 succinimidyl ester 1 mg
      AAT Bioquest iFluor® 488 succinimidyl ester

      產(chǎn)品詳情
      品牌AAT Bioquest貨號1023
      規(guī)格1 mg供貨周期現(xiàn)貨

      AAT Bioquest 1023/1029/1030 iFluor® 488/594/633 succinimidyl ester

      我們北京云肽生物科技有限公司作為AAT Bioquest公司的特約經(jīng)銷商為客戶提供,正規(guī)進(jìn)口,保證原裝正品,貨期穩(wěn)定的服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest,Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測領(lǐng)域,包括吸收(顏色),熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助quan世界的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué),免疫學(xué),細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會不斷介紹新產(chǎn)品,快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

      AAT Bioquest 1023  iFluor® 488 succinimidyl ester  1 mg

      AAT Bioquest  1029  iFluor® 594 succinimidyl ester  1 mg

      AAT Bioquest  1030  iFluor® 633 succinimidyl ester  1 mg

      AAT Bioquest iFluor® 488 succinimidyl ester

      AAT Bioquest 1023  iFluor® 488 succinimidyl ester 1 mg,產(chǎn)品說明:

      分子量

      945.07

      校正系數(shù)(260 nm)

      0.21

      校正系數(shù)(280 nm)

      0.11

      消光系數(shù)(厘米-1M-1)

      7500001

      激發(fā)(納米)

      491

      發(fā)射(納米)

      516

      量子產(chǎn)率

      0.91

      盡管FITC仍然是制備綠色熒光生物偶聯(lián)物zui常用的熒光標(biāo)記染料,但FITC存在一定的局限性,例如顯微鏡成像的嚴(yán)重光漂白和pH敏感熒光。用iFluor® 488染料制備的蛋白質(zhì)偶聯(lián)物遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于熒光素衍生物(如FITC)的偶聯(lián)物。iFluor® 488偶聯(lián)物比熒光素偶聯(lián)物明顯更亮,并且更易于光化。此外,iFluor® 488的熒光不受pH值(4-10)的影響。這種pH不敏感性是對熒光素的重大改進(jìn),熒光素僅在pH高于9時(shí)發(fā)出最大熒光。iFluor® 488 SE染料相當(dāng)穩(wěn)定,對蛋白質(zhì)氨基基團(tuán)具有良好的反應(yīng)性和選擇性。這款iFluor 488具有類似于Alexa Fluor 488 NHS酯的光譜特性和反應(yīng)性(Alexa Fluor®®®是Invitrogen的商標(biāo))。

      示例協(xié)議

      儲備溶液的制備

      除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

      蛋白質(zhì)儲備溶液(溶液A)

      1. 100 μL 反應(yīng)緩沖液(例如,pH ~1.1 的 9 M 碳酸鈉溶液或 0 M 磷酸鹽緩沖液)與 900 μL 目標(biāo)蛋白溶液(例如抗體、蛋白質(zhì)濃度 >如果可能,為 2 mg/mL)混合,得到 1 mL 蛋白質(zhì)標(biāo)記儲備溶液。

      注意: 蛋白質(zhì)溶液(溶液A)的pH值應(yīng)為8.5±0.5。如果蛋白質(zhì)溶液的pH值低于8.0,則使用8 M碳酸qing鈉溶液或0 M pH 9.0磷酸鹽緩沖液將pH調(diào)節(jié)至1.1-9.0的范圍。

      注意: 蛋白質(zhì)應(yīng)溶解在1X磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中,pH 7.2-7.4。如果蛋白質(zhì)溶解在Tris或an酸緩沖液中,則必須用1X PBS(pH 7.2-7.4)透析,以除去廣泛用于蛋白質(zhì)沉淀的游離胺或銨鹽(如**銨和乙**)。

      注意: 不純抗體或用牛血清白蛋白(BSA)或明膠穩(wěn)定的抗體將無法很好地標(biāo)記。疊***或硫柳汞的存在也可能干擾綴合反應(yīng)。疊***或硫柳汞可以通過透析或離心柱去除,以獲得最佳標(biāo)記結(jié)果。

      注意: 如果蛋白質(zhì)濃度低于2 mg/mL,偶聯(lián)效率會顯著降低。建議最終蛋白質(zhì)濃度范圍為 2-10 mg/mL,以獲得最佳標(biāo)記效率。

      iFluor™ 488 SE儲備液(溶液B)

      1. 將無水DMSO加入iFluor™ 488 SE的小瓶中,制成10 mM儲備溶液。通過移液或渦旋充分混合。

      注意: 在開始偶聯(lián)之前制備染料儲備溶液(溶液B)。請及時(shí)使用。延長染料儲備溶液的儲存可能會降低染料活性。溶液B在避光和潮濕的情況下可以在冰箱中儲存兩周。避免凍融循環(huán)。

      實(shí)驗(yàn)方案樣本

      該標(biāo)記方案是為山羊抗小鼠IgG與iFluor™ 488 SE的偶聯(lián)物開發(fā)的。您可能需要進(jìn)一步優(yōu)化您的特定蛋白質(zhì)。

      注意: 每種蛋白質(zhì)都需要不同的染料/蛋白質(zhì)比例,這也取決于染料的性質(zhì)。蛋白質(zhì)的過度標(biāo)記可能會對其結(jié)合親和力產(chǎn)生不利影響,而低染料/蛋白質(zhì)比例的蛋白質(zhì)偶聯(lián)物會降低靈敏度。

      運(yùn)行偶聯(lián)反應(yīng)

      1. 使用溶液B(染料)/溶液A(蛋白質(zhì))的10:1摩爾比作為起點(diǎn):將5 μL染料儲備溶液(溶液B,假設(shè)染料儲備溶液為10 mM)加入蛋白質(zhì)溶液(95 μL溶液A)的小瓶中,有效搖勻。假設(shè)蛋白質(zhì)濃度為0mg / mL,蛋白質(zhì)的分子量為~05KD,蛋白質(zhì)的濃度為~10.200mM。

      注意: 我們建議使用溶液B(染料)/溶液A(蛋白質(zhì))的摩爾比為10:1。如果太少或太高,請分別在 5:1、15:1 和 20:1 確定最佳染料/蛋白質(zhì)比例。

      2. 繼續(xù)在室溫下旋轉(zhuǎn)或搖動反應(yīng)混合物30-60分鐘。

      純化偶聯(lián)

      以下方案是使用Sephadex G-25色譜柱純化的染料-蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的示例。

      1. 根據(jù)制造說明制備Sephadex G-25色譜柱。

      2. 將反應(yīng)混合物(來自“運(yùn)行共軛反應(yīng)")加載到Sephadex G-25色譜柱的頂部。

      3. 一旦樣品剛好在頂部樹脂表面下方運(yùn)行,就加入PBS(pH 7.2-7.4)。

      4. 向所需樣品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色譜柱純化。合并含有所需染料-蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的級分。

      注意: 為了立即使用,染料-蛋白偶聯(lián)物必須用染色緩沖液稀釋,并等分用于多種用途。

      注意: 對于長期儲存,染料-蛋白質(zhì)偶聯(lián)物溶液需要濃縮或冷凍干燥。

      產(chǎn)品系列

      產(chǎn)品名稱

      激發(fā)

      (納米)

      發(fā)射

      (納米)

      消光系數(shù)

      (厘米-1M-1)

      量子產(chǎn)率

      校正系數(shù) 260 nm)

      校正系數(shù) 280 nm)

      iFluor® 350 succinimidyl ester

      345

      450

      200001

      0.951

      0.83

      0.23

      iFluor® 405 succinimidyl ester

      403

      427

      370001

      0.911

      0.48

      0.77

      iFluor® 514 succinimidyl ester

      511

      527

      750001

      0.831

      0.265

      0.116

      iFluor® 532 succinimidyl ester

      537

      560

      900001

      0.681

      0.26

      0.16

      iFluor® 555 succinimidyl ester

      557

      570

      1000001

      0.641

      0.23

      0.14

      iFluor® 594 succinimidyl ester

      588

      604

      1800001

      0.531

      0.05

      0.04

      iFluor® 633 succinimidyl ester

      640

      654

      2500001

      0.291

      0.062

      0.044

      iFluor® 647 succinimidyl ester

      656

      670

      2500001

      0.251

      0.03

      0.03

      iFluor® 660 succinimidyl ester

      663

      678

      2500001

      0.261

      0.07

      0.08

      iFluor® 680 succinimidyl ester

      684

      701

      2200001

      0.231

      0.097

      0.094

      iFluor® 700 succinimidyl ester

      690

      713

      2200001

      0.231

      0.09

      0.04

      iFluor® 750 succinimidyl ester

      757

      779

      2750001

      0.121

      0.044

      0.039

      iFluor® 610 succinimidyl ester

      610

      628

      1100001

      0.851

      0.32

      0.49

      iFluor® 710 succinimidyl ester

      717

      739

      1900001

      0.601

      0.12

      0.07

      iFluor® 790 succinimidyl ester

      787

      812

      2500001

      0.131

      0.1

      0.09

      iFluor® 800 succinimidyl ester

      801

      820

      2500001

      0.111

      0.03

      0.08

      iFluor® 810 succinimidyl ester

      811

      822

      2500001

      0.051

      0.09

      0.15

      iFluor® 820 succinimidyl ester

      822

      850

      2500001


      0.11

      0.16

      iFluor® 860 succinimidyl ester

      853

      878

      2500001


      0.1

      0.14

      iFluor® 546 succinimidyl ester

      541

      557

      1000001

      0.671

      0.25

      0.15

      iFluor® 568 succinimidyl ester

      568

      587

      1000001

      0.571

      0.34

      0.15

      iFluor® 430 succinimidyl ester

      433

      498

      400001

      0.781

      0.68

      0.3

      iFluor® 450 succinimidyl ester

      451

      502

      400001

      0.821

      0.45

      0.27

      iFluor® 840 succinimidyl ester

      836

      879

      2000001

      -

      0.2

      0.09

      iFluor® 560 succinimidyl ester

      560

      571

      1200001

      0.571

      0.0482

      0.069

      iFluor® 670 succinimidyl ester

      671

      682

      2000001

      0.551

      0.03

      0.033

      iFluor® 460 succinimidyl ester

      468

      493

      800001

      ~0.81

      0.98

      0.46

      iFluor® 440 succinimidyl ester

      434

      480

      400001

      0.671

      0.352

      0.229

      iFluor® 665 succinimidyl ester

      667

      692

      110,0001

      0.221

      0.12

      0.09

      iFluor® 690 succinimidyl ester

      685

      704

      2200001

      0.301

      0.09

      0.06

      iFluor® 720 succinimidyl ester

      716

      740

      2400001

      0.141

      0.15

      0.13

      iFluor® 740 succinimidyl ester

      742

      764

      2250001

      0.201

      0.16

      0.16

      iFluor® 597 succinimidyl ester

      598

      618

      1000001

      0.71

      0.335

      0.514

      iFluor® 770 succinimidyl ester

      777

      797

      2500001

      0.16

      0.09

      0.08

      iFluor® 780 succinimidyl ester

      784

      808

      2500001

      0.161

      0.13

      0.12

      iFluor® 570 succinimidyl ester

      560

      571

      1200001

      0.581

      0.048

      0.069

      iFluor® 830 succinimidyl ester

      830

      867

      -

      -

      -

      -

      AAT Bioquest  1029  iFluor


      AAT Bioquest  1029  iFluor® 594 succinimidyl ester  1 mg,產(chǎn)品說明:

      iFluor 594琥珀酰亞胺酯是iFluor系列熒光標(biāo)記染料之一,可以覆蓋整個(gè)可見光譜。 所有iFluor 染料都具有優(yōu)異的水溶性。 它們的親水性使有機(jī)溶劑的使用極小化。 與常規(guī)的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的標(biāo)記性能。 一些iFluor 染料在某些抗體上明顯優(yōu)于Alexa Fluor 標(biāo)記染料。 它們是用于標(biāo)記蛋白質(zhì)和核酸的極便宜的熒光染料(替代Alexa Fluor 染料)。 每種iFluor染料的開發(fā)都與特定的Alexa Fluor 或其他標(biāo)記染料(如DyLight 染料)的光譜特性相匹配。

      琥珀酰亞胺基(NHS)酯被證明是用于胺修飾的ji佳試劑,因?yàn)樾纬傻孽0锋I基本上與天然肽鍵相同并且穩(wěn)定。 這些試劑通常是穩(wěn)定的并且與脂族胺顯示出良好的反應(yīng)性和選擇性。 當(dāng)琥珀酰亞胺酯化合物用于綴合反應(yīng)時(shí),需要考慮的因素很少:1.溶劑:在大多數(shù)情況下,活性染料應(yīng)溶于無水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亞砜(DMSO)中。 2.反應(yīng)pH:胺與琥珀酰亞胺酯的標(biāo)記反應(yīng)強(qiáng)烈依賴于pH。 胺反應(yīng)性試劑與非質(zhì)子化脂族胺基團(tuán)反應(yīng),包括蛋白質(zhì)的末端胺和賴氨酸的β-氨基。 因此,胺?;磻?yīng)通常在pH 7.5以上進(jìn)行。 通過琥珀酰亞胺酯進(jìn)行的蛋白質(zhì)修飾通??梢栽趐H 8.5-9.5下進(jìn)行。 3.反應(yīng)緩沖液:使用胺反應(yīng)試劑時(shí),必須避免使用含有游離胺(如Tris和an酸)和硫醇化合物的緩沖液。 廣泛用于蛋白質(zhì)沉淀的銨鹽(例如硫酸銨和乙酸銨)也必須在進(jìn)行染料綴合之前除去(例如通過透析)。 4.反應(yīng)溫度:大多數(shù)綴合在室溫下進(jìn)行。 特定標(biāo)記反應(yīng)可能需要升高或降低的溫度。 iFluor系列染料是AF系列染料的wan美替代品。

      AAT Bioquest  1030  iFluor® 633 succinimidyl ester,產(chǎn)品說明:

      iFluor 633琥珀酰亞胺酯是iFluor系列熒光標(biāo)記染料之一,可以覆蓋整個(gè)可見光譜。 所有iFluor 染料都具有優(yōu)異的水溶性。 它們的親水性使有機(jī)溶劑的使用極小化。 與常規(guī)的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的標(biāo)記性能。 一些iFluor 染料在某些抗體上明顯優(yōu)于Alexa Fluor 標(biāo)記染料。 它們是用于標(biāo)記蛋白質(zhì)和核酸的極便宜的熒光染料(替代Alexa Fluor 染料)。 每種iFluor染料的開發(fā)都與特定的Alexa Fluor 或其他標(biāo)記染料(如DyLight 染料)的光譜特性相匹配。

      琥珀酰亞胺基(NHS)酯被證明是用于胺修飾的 ji jia試劑,因?yàn)樾纬傻孽0锋I基本上與天然肽鍵相同并且穩(wěn)定。 這些試劑通常是穩(wěn)定的并且與脂族胺顯示出良好的反應(yīng)性和選擇性。 當(dāng)琥珀酰亞胺酯化合物用于綴合反應(yīng)時(shí),需要考慮的因素很少:1.溶劑:在大多數(shù)情況下,活性染料應(yīng)溶于無水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亞砜(DMSO)中。 2.反應(yīng)pH:胺與琥珀酰亞胺酯的標(biāo)記反應(yīng)強(qiáng)烈依賴于pH。 胺反應(yīng)性試劑與非質(zhì)子化脂族胺基團(tuán)反應(yīng),包括蛋白質(zhì)的末端胺和賴氨酸的β-氨基。 因此,胺?;磻?yīng)通常在pH 7.5以上進(jìn)行。 通過琥珀酰亞胺酯進(jìn)行的蛋白質(zhì)修飾通??梢栽趐H 8.5-9.5下進(jìn)行。 3.反應(yīng)緩沖液:使用胺反應(yīng)試劑時(shí),必須避免使用含有游離胺(如Tris和an酸)和硫醇化合物的緩沖液。 廣泛用于蛋白質(zhì)沉淀的銨鹽(例如硫酸銨和乙酸銨)也必須在進(jìn)行染料綴合之前除去(例如通過透析)。 4.反應(yīng)溫度:大多數(shù)綴合在室溫下進(jìn)行。 特定標(biāo)記反應(yīng)可能需要升高或降低的溫度。 iFluor系列染料是AF系列染料的wan美替代品。

      AAT Bioquest iFluor® 488 succinimidyl ester

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      AAT Bioquest

      162

      Cyanine 7 maleimide [equivalent to Cy7® maleimide]

      1 mg

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      175

      Cyanine 5.5 maleimide [equivalent to Cy5.5® maleimide]

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      iFluor® 488 succinimidyl ester

      1 mg

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      iFluor® 594 succinimidyl ester

      1 mg

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      1030

      iFluor® 633 succinimidyl ester

      1 mg

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